PCR
Introducción
- Cebadores: Son capaces de acotar la región específica del DNA que la polimerasa va a reconocer y por tanto va a amplificar. Los cebadores son diseñados por el investigador de manera que van a ser capaces de reconocer entre todo el genoma la región que se desea amplificar.
- dNTPs: Van a ser el sustrato enzimático de la polimerasa para poder dar lugar a las nuevas hebras de DNA que se sinteticen.
- MgCl2: El Mg es el cofactor de la polimerasa. Su concentración va a determinar la actividad enzimática, por lo tanto hay que ajustarla finamente para evitar amplificaciones inespecíficas.
- Muestra: Es necesario introducir el DNA desde el que se multiplicará nuestra secuencia. Puede ser DNA bacteriano, vegetal, humano…
Para motivar la amplificación del DNA es necesario someter el proceso a unos ciclos de temperatura que va a permitir que se deshibride la doble cadena de DNA de manera que
Una vez amplificado el DNA se realizará una electroforesis en la que se podrá determinar si el DNA amplificado contenía o no contenía la región específica que se buscaba.
Tarea
Los alumnos deberán realizar las siguientes tareas para aprobar la presente unidad didáctica:
- Deberán realizar un resumen de 150 palabras en el que se detalle claramente qué es la PCR, cómo se realiza y para qué.
- Consultando las páginas web recomendadas deberán realizar un trabajo en el que se detalle un experimento en el que se use la PCR o bien explicar innovaciones que se hayan producido en torno a la técnica PCR.
Proceso
Para realizar esta tarea los alumnos podrán disponerse en grupos de un máximo de cuatro y un mínimo de tres. Para realizar la tarea los alumnos podrán consultar las páginas abajo mencionadas o bien podrán consultar otras páginas web que deberán ser citadas a fin de asegurar la credibilidad de las fuentes informantes.
Enlaces
Parea completar la unidad el alumno podrá completar sus conocimientos y resolver sus dudas accediendo a las siguientes páginas:
Conclusión
Se pretende que los alumnos adquieran los conocimientos básicos a cerca del uso y funcionamiento de la PCR. De la misma manera se pretende que aprendan cual es la filosofía de trabajo en la que tiene cabida esta técnica. Por otra parte, se pretende también que adquieran capacidades críticas a la hora de discernir la fiabilidad de determinadas páginas web.